核酸の濃度測定 | tkomtkomtkom@OCU

核酸の濃度測定

□ フォトメーターのスイッチを測定10~15分前に入れておく。またこの際パソコンも立ち上げておく。
フォトメーターの電源は30分以上つけっぱなしにしないこと。UVランプがへたる。パソコンのスイッチは左側面にある。
□ パソコンのデスクトップにある『GENE SPEC 1』を開く。
□ 内蔵されたキュベットをDWで洗浄する。
□ キュベットにブランクとなる溶液を入れる。50μl以上の溶液が必要。これ以下の量になると測定できない。

□ 『GENE SPEC 1』の『光度計』の『ベースライン』をクリック。ベースラインがとれているか心配なときは、『測定』をクリックして確認する。
□ キュベットにサンプルを入れる。最低量50μl 必要。
□ 『GENE SPEC 1』の『光度計』の『測定』をクリックし、260nmと280nmの吸光度を記録する。
□ 吸光度が2.5以上の値となったときは測定できていないので希釈して測定し直す。Ratioが1.7以下だときれいな値とはいえない。
□ キュベットをDWで洗浄する。
□ フォトメーターの電源を切る。(重要)
□ 測定したODから濃度を計算する。
   
 計算式  
 (260nmの値)×(希釈倍率)×(定数)
  
 定数はRNA 0.04、DNA 0.05

以上文責佐久間(4回生)

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